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牛痘病毒-拓撲異構酶

更新時間:2024-12-04

簡要描述:

牛痘病毒-拓撲異構酶來源于牛痘病毒(vaccinia virus),通過基因重組方案制備純化。

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公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷!

商品屬性

貨號

產品名稱

規(guī)格

P-PR1398

牛痘病毒-拓撲異構酶

500U

P-PR1398

牛痘病毒-拓撲異構酶

5KU

產品介紹:

該 Topoisomerase I 來源于牛痘病毒(vaccinia virus),通過基因重組方案制備純化。其能解旋DNA的超螺旋結構,除此外其能識別并切割雙鏈 DNA 末端 [5’C(T)CCTT↓],并且與 DNA 形成共價連接形成穩(wěn)定復合物。該共價復合物遇
到DNA 的5’-OH基團后,重新連接形成完整 DNA 鏈。因此,使用該酶可作為 DNA 連接的有效工具,可用于 DNA 的載體連接(TOPO 克隆載體制備)、接頭連接(NGS 建庫)等實驗。

應用
DNA-載體連接
接頭連接
儲存:-20°C 可保存 3 年。
TOPO 酶保存液:20mM Tris-HCl,pH7.8,150mM NaCl,
0.1% Tween20,50%甘油。
反應實例 1(質粒解旋)
10×TOPO Buffer 2.5 μl
超螺旋質粒 DNA 1-20 μg
Vaccinia TOPO (5pmol/μl) 1 μl
ddH2O Up to 25 ul
37°C 孵育 5-15min。

注意:

(1)雙鏈接頭 A 通常 5’做 NH2 封閉修飾,以防止自連接;接頭 A 的 CCCTT 后通常包含 5-12bp 尾巴,再長的尾巴會導致連接效率大幅下降;
(2)雙鏈接頭 B 的 5’端必須包含-OH。
(3)由于該酶應用廣泛,在不同的實驗中使用策略不同,需要靈活運用。

5.jpg

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