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桔梗染料法PCR鑒定試劑盒保存

更新時間:2024-11-24

簡要描述:

桔梗染料法PCR鑒定試劑盒保存公司相關(guān)產(chǎn)品甲基當(dāng)藥寧 Methylswertianin 22172-17-4 分子式:C15H12O6 分子量:288.25
甲素 Triptolide 甲素 Triptolide 38748-32-2 分子式:C20H24O6 分子量:360.40
沒食子酸辛酯 Octyl gallate 沒食子酸辛酯 Octyl gal

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實驗流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。

產(chǎn)品名稱

桔梗染料法PCR鑒定試劑盒保

英文名稱

platycodonis

貨號

BH-P99692

特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)地黃保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠 50 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR
6. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗阪崎腸桿菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發(fā)病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 765432
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
注:上述樣品建議經(jīng)過增菌后,收集培養(yǎng)物用于檢測。
二、DNA提取:
可采用PCR試劑盒配備的DNA抽提液,按以下說明進行DNA核酸的粗提。也可采購上海澤葉生物科技有限公司生產(chǎn)的DNA提取試劑盒(過柱法-熒光配套)或其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品,并按照相應(yīng)試劑盒說明進行操作。
1、液體培養(yǎng)物:取液體培養(yǎng)物100μL加到1.5mL無菌離心管中,8000rpm離心3min,盡量吸棄上清,加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
2、固體培養(yǎng)物:挑取單克隆菌落與50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min13000rpm離心3min,取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
3、糞便樣品:挑取米粒大小糞便于滅菌離心管中,加入0.5mL生理鹽水,振蕩混勻,13000rpm離心3分鐘,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
4、其他液體標(biāo)本:取標(biāo)本2-3mL13000rpm離心3min,棄上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混勻,100℃恒溫10min13000rpm離心3min取上清5μL進行PCR反應(yīng)。
注:陽性對照和陰性對照為已經(jīng)抽提好的核酸(無需提取),直接取5μL加入到反應(yīng)體系中即可。由于陽性對照濃度較高,建議在樣品制備區(qū)域加入陽性對照。
人小膠質(zhì)細(xì)胞總RNAHM NA七水(AR)Iron(II) sulfate, heptahydrate質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%

CD68 Others Rat 大鼠 CD68 / Macrosialin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1酸三鉀Potassium phosphate, tribasic質(zhì)量規(guī)格:>98%

人上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL鈣黃綠素二鈉鹽Calcein,  salt質(zhì)量規(guī)格:IND grade

COS-7細(xì)胞,SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚腎細(xì)胞) 雜交瘤(B);Z1510C6D10F4G6植酸鈉Phytic acid dodeca salt hydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

EFNB2A Protein Danio rerio (zebrafish) 重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白 (His 標(biāo)簽)菊粉;菊糖Inulin from chicory質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR
大鼠骨髓瘤細(xì)胞;Y3-Ag 1.2.3神經(jīng)氨酸酶(10 units/ mg )質(zhì)量規(guī)格:≥10 units/ mg Neuraminidase from Clostridium perfringens

CD33 Others Human CD33 / Siglec-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙酸鎳四水(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCNickel (II) acetate, tetrahydrate

CL-0013A2780(人卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2氧化(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Oxymatrine

KB細(xì)胞,人口腔表皮樣癌細(xì)胞 人血管內(nèi)皮細(xì)胞,VE細(xì)胞 大鼠肝癌細(xì)胞;RH-35內(nèi)酯質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRAndrographolide

BT-549(人管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Andrographolide
Hela, 人細(xì)胞系 小鼠成纖維細(xì)胞,3T3TK細(xì)胞 SPA-A1(肺腺癌細(xì)胞)泡蛙肽質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRPhysalaemin

小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞;RAW 264.7 [RAW264.7PKI-tide質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRPKI-tide

FGFR2 Others Human FGFR2 / CD332 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 血小板因子4質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRPlatelet Factor 4 (58-70)(human)

小鼠子細(xì)胞;U14Pneumadin,人質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRPneumadin (human)

IL18R1 Others Canine IL18R1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1酸鋅四水(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRZinc phosphate tetrahydrate
桔梗染料法PCR鑒定試劑盒保存CD80 Others Human B7-1 / CD80 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) TRICINE三羥甲基甲基甘酸1IND

人肝細(xì)胞RNAHH miRNA5 μg1-十二流醇 1-Dodqccnqthiol 11-22-0

大鼠心肌細(xì)胞(RCM)(1×106)M-TGE肉湯shēng huà shì jì容量:500毫升

荷蘭白花奶肺細(xì)胞;DCL1錄化-2-羥基-3-()基聚環(huán)氧纖維素,英文名或英文縮寫:Polyquaternium-10,級別:IND,規(guī)格:25

T739小鼠肺腺癌瘤株
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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